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　　3讨论

　　3.1提取溶媒和方法的考察

　　考察了甲醇、乙醇和水提取样品后的特征图谱情况，发现甲醇提取样品的特征图谱色谱峰多、峰高较高，因此，初步选择甲醇作为提取溶剂。进一步考察了40%，60%，80%的甲醇溶液提取的样品的特征图谱，结果表明80%甲醇提取的供试液中色谱峰个数较多，且整体图形中各峰峰面积大小相对较均匀，故提取溶媒选择80%甲醇。对超声和回流2种不同提取方法进行比较，二者提取液中峰数及峰面积相差不大，超声方法较简便快捷，故选择超声提取方式。同时对提取时间（20，30，40，50min）、溶媒用量（20，30，40，50mL）进行考察，最终确定上述2.3项下供试品溶液的制备方法。

　　3.2色谱条件的考察

　　分别考察了乙腈-水，乙腈-0.4%磷酸溶液，甲醇-0.4%磷酸溶液流动相系统，结果表明，以甲醇-水为流动相时，图谱信息较少，30min后才出色谱峰。流动相中以0.4%的磷酸浓度最为适宜，若采用0.2%的磷酸，部分色谱峰分离度差。以乙腈-0.4%磷酸为流动相时，色谱峰信息较丰富，且各色谱峰分离度较好，因此选择乙腈（A）-0.4%磷酸（B）为流动相。经分析样品特征图谱3D数据、等吸收图，发现沙棘膏色谱峰的吸收主要集中在360nm及250nm左右。由于250nm的低波长处各类物质均有较大吸收，干扰大;沙棘膏主要有效成分为黄酮类成分，因此选择360nm进行特征图谱的测定。同时对流速（0.9，1.0，1.1mL·min-1），柱温（25，30，35，40℃）进行了考察，最终确定了2.1项下色谱方法。

　　3.3相似度结果分析

　　15批次沙棘膏与对照指纹图谱的相似度比较结果可见，除了S14批次样品的相似度<0.9，其余批次的沙棘膏相似度均在0.9以上，说明大部分批次样品的化学成分具有一致性。从色谱图中可见，样品色谱图中7号峰的峰高明显高于色谱图中其他峰，说明沙棘膏样品中异鼠李素含量相对较高。此外，样品搜集过程中了解到，有的地区还使用西藏沙棘制备沙棘膏，本文共获得了4批（S20，S21，S22，S23）由西藏沙棘制备的沙棘膏，其指纹图谱与15批中国沙棘制备的沙棘膏指纹图谱生成的对照图谱，相似度见表4。

　　从表4可知，来源于西藏沙棘的沙棘膏与对照指纹图谱比较，相似度均不足0.85，说明本文制定的相似度评价标准可很好的用于沙棘膏的品种鉴别。

　　相关研究表明，我国民族药的质量标准研究尚存在标准缺失严重，收载品种和种类有限;药材基原不清、品种混乱;有效成分不明、缺乏法定标准物质等诸多问题[10]。本实验所收集的沙棘膏样品也存在品种不清楚、制备工艺不统一等问题，从而导致部分沙棘膏指纹图谱差异性较大，相似度较低，为了进一步规范和完善沙棘膏的质量标准，尚需对其品种和制备工艺进行深入研究。

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